Fixação de células para FACS
Fixação de células para FACS
Após tripsinizar as células (3-8x10^5), lavar 1x PBS.
Adicionar 500 ul de PBS. Ressuspender bem as células, evitando formar grumos.
Adicionar 1500 ul de etanol gelado. Ressuspender bem as células, evitando formar grumos.
Deixar no gelo por 20 min.
Centrifugar a 800g/5min.
Retirar o sobrenadante
Lavar 1x PBS
Guardar na geladeira com 1 ml de PBS.
20 min antes de passar as amostras no citometro, adicionar 2 ul de iodeto de propideo (25 mg/ml) e 10 ul RNAase A (10mg/ml).
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